可見分光光度計(jì)是利用物質(zhì)對(duì)選擇性吸收光進(jìn)行定性或定量分析的各種行業(yè)的材料已被廣泛應(yīng)用，主要用于物質(zhì)純度檢測(cè)，定量分析，材料結(jié)構(gòu)鑒定。可測(cè)量的結(jié)果總是可以接受或不可接受的誤差，誤差來自于測(cè)量過程的各個(gè)方面，我認(rèn)為儀器本身的主要來源，以及測(cè)量條件的選擇，兩個(gè)方面。

1、儀器本身性能帶來的誤差

1.1、復(fù)色光對(duì)比耳定律的偏離

比耳定律是建立前提的先決條件是人們拍攝的光是單色的，但是儀器的精度又高，甚至雙單色儀可見分光光度計(jì)，只能得到近單色光，不能獲得純單色光，它仍然 包含窄帶的光，具有復(fù)雜光的性質(zhì)。雖然復(fù)雜的光將導(dǎo)致正或負(fù)偏差的比爾定律。固定狹縫紫外分光光度計(jì)的光譜帶寬般為1nm或2nm，可調(diào)節(jié)狹縫可以做到0. Inm；可見分光光度計(jì)帶寬為6nm，snm，甚至十幾納米。光譜帶寬應(yīng)盡可能小，但隨著光譜分辨率的增加，儀器的靈敏度降低，因此選擇儀器來考慮各種條件的影響。 當(dāng)溶液的濃度小且單色光相對(duì)純時(shí)，可以近似于Beer定律。

1.2、雜散光的影響

雜散光是指在要測(cè)量的波長的光譜帶寬之外進(jìn)入檢測(cè)器的其他波長分量，這是光譜測(cè)量中的主要誤差源。 原因是：上海菁華可見分光光度計(jì)色散組件，反射鏡，透鏡和單色器壁灰塵。 在可見分光光度計(jì)的波段的邊緣，由于單色器光透射率，光源輻射強(qiáng)度，檢測(cè)器靈敏度低，雜散光的影響更為顯著。雜散光限制儀器的分析限可導(dǎo)致嚴(yán)重的測(cè)量誤差，實(shí)際工作中，在定量分析時(shí)，般在吸收峰或接近測(cè)量樣品的吸光度，如果分析含有雜散光的波長，則樣品光透射速率，并且通過在真實(shí)吸光度以下的大部分測(cè)量的吸光度來散射光。

1.3、儀器噪聲對(duì)測(cè)t的影響

儀器噪聲也是儀器的個(gè)重要指標(biāo)，它表征儀器做稀溶液的能力。是疊加在待測(cè)量的分析信號(hào)中的不需要的信號(hào)，掃描100%T和0%T線，可觀察到分光光度計(jì)的絕對(duì)噪聲水平，如果儀器噪聲較大，會(huì)掩蓋較小的測(cè)量信號(hào)，般用噪音的二倍來表示儀器的靈敏度。

1.4、波長和吸光度準(zhǔn)確度

樣品的每個(gè)值都是在定的波長下測(cè)得的，如果波長誤差很大，測(cè)出的值肯定不準(zhǔn)。吸光度準(zhǔn)確度也是用戶對(duì)儀器的直接要求，更應(yīng)引起足夠的重視。家計(jì)量檢定規(guī)程規(guī)定雙光束紫外可見分光光度計(jì)透射比準(zhǔn)確度為A士0.6%, B土1.0%。

2、測(cè)量條件的選擇

2.1、參比溶液和溶荊的選擇

上海儀電分析可見分光光度計(jì)實(shí)際上以穿過參考單元的光的強(qiáng)度作為人放射性的強(qiáng)度來測(cè)量樣品的吸光度。調(diào)節(jié)儀器使得通過參比池的溶液的吸光度為零，然后相同的光束通過樣品，使得吸光度相對(duì)真實(shí)反映待測(cè)物質(zhì)的濃度，因此選擇的參考解決方案非常重要。如果只有待測(cè)量的物質(zhì)被顯色劑的反應(yīng)產(chǎn)物吸收，則純?nèi)軇┗蛘麴s水可用作參比溶液。如果顯色劑的顏色，在測(cè)量波長處的吸收，使用試劑溶液作為參比溶液，加入試劑量等試劑，并且樣品應(yīng)與加入量致。如果樣品本身中其它組分的顏色干擾測(cè)定，并且所用的顯色劑沒有著色，則沒有顯影劑的樣品

溶液作參比液。

正確選擇合適的溶劑，對(duì)提高分析的準(zhǔn)確度起重要作用。為減小溶劑中雜質(zhì)的影響，應(yīng)選擇高純度的溶劑;溶劑應(yīng)不與待測(cè)物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng);待測(cè)物在溶劑中要有定的溶解度;在測(cè)定的波長范圍內(nèi)，溶劑本身沒有吸收，注意常用溶劑的短可用波長;當(dāng)用揮發(fā)性大的溶劑時(shí)，測(cè)量過程中吸收池應(yīng)加蓋。

2.2、測(cè)試波長的選擇

當(dāng)用可見分光光度計(jì)對(duì)溶液進(jìn)行測(cè)定時(shí)，先需要選擇合適的測(cè)量波長。選擇的依據(jù)是該被測(cè)溶液的吸收曲線。在般情況下，我們總是選擇大吸收波長作為測(cè)量波長，這樣可以提高靈敏度。而在有些情況下大吸收峰很尖銳、吸收過大或附近有干擾存在，就不能選大吸收波長，而必須在保證有定靈敏度的情況下，選擇吸收曲線中的其它波長進(jìn)行測(cè)定（曲線較平坦處對(duì)應(yīng)的波長），以消除干擾。繪制吸收曲線是正確選擇波長的有效手段和方法。

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